關(guān)于姬姆薩染料的使用方法

姬姆薩染色簡稱姬氏染色，是用天青色素、伊紅、次甲藍混合而成的姬姆薩染料對血液涂抹標(biāo)本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等標(biāo)本進行染色的染色方法。染前用蛋白酶等進行處理，然后再用姬姆薩染液染色，在染色體上，可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色，胞漿染成粉紅色，在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細胞及染色體圖像。

用途： 可用于制作血液涂片檢查寄生性原生動物，如瘧原蟲、錐蟲(trypanosomes)。

敏感性： 對濕度敏感。

推薦使用方法

1. 姬姆薩染色液原液配制

配方：0.5g 姬姆薩粉末，33 ml 甘油；33ml 甲醇；

配制過程：

1）取0.5g姬姆薩染料粉末加入33ml甘油，混勻。讓其保持在55-60°C并攪拌促使溶解2h；

2）然后加入33ml甲醇，充分搖勻，并將其置于55-60°C溫箱中并攪拌24h促使充分溶解。

3）Whatman #1號濾紙過濾除去沉淀物，此時即得到姬姆薩染色液原液，裝于棕色小口試劑瓶內(nèi)，室溫長期保存。

2. 血液涂片染色方法

注意：染色工作液需要現(xiàn)配現(xiàn)用。染色工作液的用量需要根據(jù)具體實驗來調(diào)整，以得到最佳染色結(jié)果為準(zhǔn)。

1) 按照常規(guī)方法制備血涂片，待血膜干燥后，用甲醇固定2min；

2) 根據(jù)血液涂片樣本的數(shù)量，以及染色工作液的濃度制備足量的染色工作液。比如取約0.67ml的姬姆薩原液加入30ml姬姆薩稀釋液配成約2%的姬姆薩工作液，裝于染色液缸中。

注意：也可通過提高染色液的工作濃度以縮短染色時間，如10%姬姆薩工作液對血液涂片染色10min。高濃度染色工作液雖然能縮短染色時間，但可能會達不到預(yù)期結(jié)果。

3)  將血玻片置于上述染色液中室溫染色40~60min，或者直到出現(xiàn)理想的結(jié)果。

4) 取出血涂片，用蒸餾水（或PBS buffer，pH 6.8）沖洗3~4次。厚涂片需要置于緩沖液中浸泡5min，使得充分沖洗。

5) 正面朝上置于染色架上使其晾干，之后做鏡檢。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。