深低溫保藏細胞的解凍

深低溫保藏細胞的解凍
深低溫保藏的細胞十分脆弱，要輕柔操作。快速解凍深低溫保藏
的細胞，然后直接將其接種到*生長培養(yǎng)基中，如果細胞對抗
凍劑（DMSO或甘油）特別敏感，則離心除去抗凍劑，然后將細胞
接種到*生長培養(yǎng)基中。下面是深低溫保藏細胞的建議解凍步
驟：
直接接種法
1．從凍存管中取出細胞，用37℃水浴快速解凍。
2．將細胞直接接種到*生長培養(yǎng)基中。每毫升凍存細胞需要　
　10-20ml*生長培養(yǎng)基。計算活細胞的個數。細胞接種量至
　少要達到3X105 活細胞/ml。
3．將細胞培養(yǎng)12-24h。更換新鮮*生長培養(yǎng)基以去除抗凍劑。
離心法
1．從凍存管中取出細胞，用37℃水浴快速解凍。
2．將1-2ml 凍存細胞接種到大約25ml*生長培養(yǎng)基中。要非常
輕柔地進行混合。
3．用大約80 X g的速度離心2-3分鐘。
4．吸除上清液。
5．用*生長培養(yǎng)基輕輕重懸解離下來的細胞，并計算活細胞的
個數。
6．接種細胞。細胞接種量至少要達到3X105 活細胞/ml。